抗熒光衰減封片劑的作用和使用方法介紹

　　抗熒光衰減封片劑是在進行熒光顯微鏡觀察時，用于對熒光組織和細(xì)胞樣品的封片。封片劑以高純度甘油為介質(zhì)，內(nèi)含抗熒光淬滅劑，有強烈的抗熒光衰減作用。樣品最大限度延長熒光持續(xù)時間和維持熒光發(fā)光強度，同時封片劑中的其它成分有助于保持組織抗原抗體處于結(jié)合狀態(tài)，適用于所有光譜范圍的熒光，能用于各種組織、細(xì)胞免疫熒光染色的自發(fā)熒光消除，特別適用神經(jīng)組織自發(fā)熒光淬滅。
 

　　許多組織會產(chǎn)生可透過各種波長濾光片的內(nèi)源性自發(fā)熒光，顯著干擾抗體標(biāo)記熒光觀察甚至導(dǎo)致熒光組化染色失敗。抗熒光衰減封片劑中的離子可用碰撞方式捕獲自發(fā)熒光光源分子發(fā)出的電子，阻止該電子從激發(fā)態(tài)回歸基態(tài)并阻止能量釋放，從而淬滅自發(fā)熒光。采用優(yōu)化的孵育時間，可以最大限度地消除自發(fā)熒光而不明顯影響抗體標(biāo)記的熒光。封片溶液成分無特殊毒性。如蓋玻片脫落或錯位，可將玻片放入PBS中取出蓋玻片，重新用封片劑封片。也可將適量封片劑直接加到細(xì)胞培養(yǎng)孔內(nèi)，進行熒光觀察。
 

　　抗熒光衰減封片劑使用方法：
 

　　1.吸去載玻片上的液體，略微晾干殘留液體。
 

　　2.取封片劑滴加在載玻片樣品處，也可直接加到細(xì)胞培養(yǎng)孔內(nèi)觀察。
 

　　3.蓋上蓋玻片，輕輕壓蓋玻片，用濾紙小心吸除蓋玻片周圍多余液體，室溫放置數(shù)分鐘。
 

　　4.直接進行熒光顯微鏡觀察。