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      β-gal 報告基因染色試劑盒

      更新日期:2023-12-14

      訪問量:5141

      廠商性質:生產(chǎn)廠家

      所在城市:上海市

      簡要描述:
      大腸桿菌中的LacZ基因編碼產(chǎn)物為β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal),β-gal較穩(wěn)定,能抵抗蛋白酶的水解,并可催化其底物X-gal產(chǎn)生藍色產(chǎn)物,所以可以方便地檢測出LacZ基因的表達。因而,LacZ基因或β-gal常用來作為報告基因,檢測表達載體介導的基因轉移表達效率,此外,也常用于基因啟動子活性的研究。
      品牌其他品牌供貨周期現(xiàn)貨
      應用領域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

       

      我公司的β-半乳糖苷酶(β-gal)報告基因染色試劑盒利用X-gal作為底物,配合試劑盒內提供的其他試劑,可對固定后的細胞、組織冰凍切片中的β-gal進行顯色,陽性結果表現(xiàn)為藍色。

      包裝清單:

      產(chǎn)品編號產(chǎn)品名稱規(guī)格
      SJ1233

      β-半乳糖苷酶(β-gal)

      報告基因染色試劑盒

      100ML
      說明書一份

      保存條件:

      -20℃保存,一年有效。其中X-Gal溶液需避光保存。

      產(chǎn)品組成:

      產(chǎn)品名稱編號名稱

      β-半乳糖苷酶(β-gal)

      報告基因染色試劑盒

      SJ1233-A試劑A
      SJ1233-B試劑B
      SJ1233-C試劑C
      SJ1233-D試劑D(X-gal)
      SJ1233-E試劑E(10× PBS)

      使用方法:

      使用前先將10 × PBS用去離子水稀釋至1× PBS。

      染色工作液需現(xiàn)配現(xiàn)用,配制方法如下:

      名稱用量
      試劑(A)25 ul
      試劑(B)25 ul
      試劑(C)25 ul
      試劑D(X-gal)125 ul
      試劑E(1× PBS)2.3 ml
      總量2.5 ml

      1、細胞樣品染色

      1)培養(yǎng)的貼壁細胞處理完成后,用4%的多聚甲醛固定10分鐘后,用PBS洗三次,每次5分鐘,去除多余的PBS;

      2)加入適量的染色工作液,放入37℃溫箱孵育1-24小時(35mm培養(yǎng)皿或6孔板一般使用1.5-2.0ml/皿(孔),其他規(guī)格的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板可依據(jù)培養(yǎng)面積的大小適量增加或減少染色液的量);

      3)在顯微鏡下觀察,當染成藍色的細胞顏色適中時,去除染色液,用1× PBS洗三次。

      4)加入適量1× PBS,鏡下觀察、拍照(染色后的標本可在4℃保存一周)

      2、組織冰凍切片染色

      1)組織冰凍切片先用去離水洗滌3次,每次5分鐘,去除OCT膠;

      2)用PBS洗滌切片3次,吸除PBS;

      3)滴加染色工作液;

      4)37℃孵育1-24小時,直至切片中的細胞的顏色變藍。孵育過程最好在溫盒中進行,以防止染色液蒸發(fā)。

       

      5)吸除染色工作液,用PBS洗滌切片3次,每次5分鐘。  

      6)水性封片劑封片后,鏡下觀察。染色后的標本片在4℃可保存數(shù)天。

      3、小組織塊染色

      1)組織塊在4%的多聚甲醛固定液中充分固定后,用自來水沖洗盡量去除固定劑;

      2)用PBS浸泡組織塊5-10分種;

      3)將組織塊轉移至染色液中,37℃孵育1-24小時(染色液的用量盡量大于組織塊體積的10倍);

      4)組織塊中出現(xiàn)藍色著色后,去除染色液,PBS洗滌三次,每次5分種。

      5)對組織進行拍照,或將組織塊進行冰凍切片后鏡下觀察。 

      注意事項:

      1、在石蠟包埋的過程中β-半乳糖苷酶可能失活,從而造成染色失敗,因此本試劑盒不建議用于石蠟切片的檢測。如果一定要用于石蠟切片的檢測,建議自行對實驗條件進行一定的優(yōu)化。

      2、染色時間較長時,請在溫盒中進行,或是增加染色液的量,以防染色液蒸發(fā)變干。

         3、染色后應及時觀察、拍照。放置過久由于藍色產(chǎn)物的擴散,可能會出現(xiàn)部分假陽性。

      備注:

                產(chǎn)品信息可能會有優(yōu)化升級,請以實際標簽信息為準。

       本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)

       

       為了您的安全和健康,請在實驗過程中做好防護工作。

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